Webbläsaren som du använder stöds inte av denna webbplats. Alla versioner av Internet Explorer stöds inte längre, av oss eller Microsoft (läs mer här: * https://www.microsoft.com/en-us/microsoft-365/windows/end-of-ie-support).

Var god och använd en modern webbläsare för att ta del av denna webbplats, som t.ex. nyaste versioner av Edge, Chrome, Firefox eller Safari osv.

Genital human papillomaviruses. Studies of their occurrence, type spectrum and expression.

Författare

Summary, in Swedish

Popular Abstract in Swedish

Vårtor (skivepitelpapillom) i hud eller slemhinna orsakas av papillomvirus. Kunskapen om detta virus var länge ganska liten eftersom det inte går att odla i cellkulturer, men med molekylärbiologins framsteg har förståelsen ökats. Varje djurart har sina egna papillomvirus och genom att jämföra nukleinsyrasekvenserna i DNA-kedjan hos olika virusisolat har man identifierat 77 typer som infekterar människan varav ca 30 orsakar infektion i det genitala området. Vissa av dessa genitala humana papillomvirus (HPV) ger upphov till könsvårtor (kondylom) medan andra befunnits associerade med vissa cancerformer. I sexuellt aktiva populationer är genital HPV infektion vanligast i 20-25 års åldern (associerat med antalet sexpartner) för att därefter sjunka med stigande ålder. Viruset försvinner vanligen inom en 2-årsperiod efter smittotillfället men kan, om infektionen är långdragen, orsaka cellförändringar på livmoderhalsen (cervix uteri), som efter flera år kan övergå i cancer. Hos kvinnor med allvarliga cellförändringar på livmoderhalsen detekteras oftast HPV typ 16, medan i icke cancerrelaterade könsvårtor HPV 6 och 11 är de vanligaste typerna. Virusinfektion kan också vara latent utan synliga tecken på infektion. För att påvisa latent HPV infektion med pyttesmå HPV DNA mängder används en method där virus DNA i provrör förökas flera miljoner gånger före detektionssteget [polymeras-kedjereaktion (polymerase chain reaction; PCR)].



Genom att använda PCR har vi påvisat HPV-infektioner hos tonårsflickor, både med och utan synliga könsvårtor, samt observerat att infektionen ofta är samtidigt förekommande i både urinrörsmynningen (uretra) och till cervix (multifocal infektion). Att HPV i hög utsträckning kunde påvisas i uretra föranledde oss att testa om urinprov kunde användas för viruspåvisning. Den funna HPV-förekomsten blev dock högre när vi testade uretra eller cervixprov jämfört med samtidigt tagna urinprov. För HPV analys kan dock urinprov vara motiverat att användas när mera invasiva provtagningssätt vill undvikas, tex hos barn.



Med PCR teknik har vi visat att ca 18% av kvinnor mellan 20-29 år, som går på gynekologisk hälsokontroll i Malmö, har HPV DNA i cervixprov. Motsvarande siffra var 27% för kvinnor utan cervicala cellförändringar kallade till gynekologisk uppföljning pga cellförändringar hittade vid tidigare gynekologisk hälsokontroll. Hos kvinnor med gravare cellförändringar var HPV förekomsten mellan 72 och 88%. Ca 85% av HPV fynden utgjordes av typer som ofta hittas hos fall av cervixcancer, med HPV 16 som den vanligaste typen. Förekomst av HPV var betydligt högre hos kvinnor med cellförändringar än hos kvinnor med normala cellprover vilket pekar mot ett samband mellan HPV infektionen och utveckling av livmoderhalscancer. Dock måste återigen starkt betonas att HPV infektion hos yngre kvinnor med normal cytologi eller låg grad av cellförändringar oftast självläker inom ca 2 år.



Eftersom HPV infektionen kan återfinnas både bland kvinnor med och utan cellförändringar vore det av intresse att undersöka om HPV infektionen är olika aktiv i de båda grupperna. Vi valde att undersöka mängden viralt budbärar RNA (messenger RNA) såsom en molekyl nödvändig för att virusproteiner ska bildas. Mängden av budbärar RNA jämfördes med mängden av HPV 16 DNA i cellprover från kvinnor som blir kallade till gynekologisk uppföljning pga cellförändringar som upptäcks vid tidigare hälsokontroll. En kvantitativ metod för mätning av mängd virus DNA och budbärar RNA med hjälp av PCR utvecklades för detta ändamål. Avsevärt högre mängder av HPV 16 DNA och budbärar RNA påvisades hos kvinnor med grava cellförändringar jämfört med hos kvinnor med normala celler eller låg grad av cellförändringar. I förhållande till mängden virus DNA sågs däremot ingen ökning av mängden budbärar RNA i prover med grava cellförändringar.



Typbestämning av HPV är ett problem, eftersom det finns minst 77 typer varav ett 30-tal kan orsaka genitala infektioner. Genom att använda en allmän HPV PCR med förmåga att finna och föröka DNA från flertalet genitala typer kan PCR produkten sedan testas för DNA sekvenslikhet (hybridisering) med ett större antal nylonfilterbundna kända HPV-typer i en enda analys. Denna applikation kunde omsättas till en icke-radioaktiv typningsmetod för genitala HPV infektioner som ej kunde typbestämmas med tillgänglig typspecifik PCR. På detta sätt kunde mindre vanliga genitala typer som HPV 34, 39, 45, 52, 53, 56 och 58 återfinnas bland patienter. Även HPV isolat med endast partiell DNA sekvenslikhet med de tidigare karakteriserade HPV-typer kan upptäckas om temperaturen sänks i hybridiseringssteget. Från ett dylikt HPV isolat producerades överlappande PCR produkter runt hela virusgenomet om tillsammans ca 8000 baspar. PCR produkterna klonades och nukleinsyrasekvensen bestämdes för hela viruset. Från DNA sekvensen kunde sedan genkartan för en ny HPV typ (HPV 70) göras upp.

Publiceringsår

1997

Språk

Engelska

Dokumenttyp

Doktorsavhandling

Förlag

Virology

Ämne

  • Microbiology in the medical area

Nyckelord

  • mRNA expression
  • microwell
  • HPV 70
  • type determination
  • CIN
  • quantification
  • urine
  • multifocal infections
  • hybridization
  • PCR
  • HPV
  • human papillomavirus
  • Microbiology
  • bacteriology
  • virology
  • mycology
  • Mikrobiologi
  • bakteriologi
  • virologi
  • mykologi

Status

Published

Forskningsgrupp

  • Clinical Microbiology, Malmö

Handledare

  • [unknown] [unknown]

ISBN/ISSN/Övrigt

  • ISBN: 91-628-2428-7
  • ISRN: LUMEDW/MEKB--1020-SE

Försvarsdatum

24 april 1997

Försvarstid

09:15

Försvarsplats

Patologiska Institutionens föreläsningssal, MAS

Opponent

  • Göran Wadell (Professor)